f] I ," I L- i ; n LNDD MODE OPERATOIRE Codification : M-EX -24 Version : C Date : 17/01/2006 1/4 METHODE DE PREPARATION POUR LA CONFIRMATION DE L'ORIGINE DES METABOLITES DE LA TESTOSTERONE PARGC/r/TTIMS Documents utilises : E-TE-OSC, I-VOL-01, 1-EX-OS, I-EX-O?. I-EX-08 et I-TRAC-03C Remplir la fiche de prtparation - confinmtion/ centre expertise en CPG/OSMRI E-TE-03C Operations Materiel Prise d'essai selon I-VOL-OI 8 m! maximum par tube Centrifiigation 5 minutes Transvaserlc sumageant dans tube prelablemcnt identifies (cfl-TllAC-OSC) Extrairc sur SPE Rapid Trace selon I-EX-06 Evaporation a sec Ajouter 1.5 ml dc tampon phosphate pH = 6.5 Agiter jusqu'a dissolution complete Ajouter 2 gouttcs de P-glucuronidase Boucher ct agiler 1 seconde HydrolyserlhOOA55°C Centrifiigation 5 minutes Transvaser le sumageant dans tubes prealablement identifies (cfI-TRAC-03C) Extrairc sur SPE Rapid Trace selon I-EX-07 Evaporation a sec Tubes Kimble 16x100 mm Pipette Biohitl -5ml Cones Biohit Ccntiifugeuse 4000 tr/min Tubes Kimble 16x100 mm Pipette Pasteur Cartouches Bond Elut CI 8 SOOmg Tubes Kimbles 16x100 mm Bain ^ sec a 60°C Dispcnsette Vortex Compte gouttc Bouchons Zymarck Vortex Etuve Centrifugeuse 4000 tr/min Tubes BCimblc 16x100 mm Pipette Pasteur Cartouches Bond Elut CI 8 200mg Tubes Kin*le 13x100 mm Bain a sec a 60°C Reactifs et produits APPLICABLE le ASSURANCE QUALlie LNDD Azote Tampon Phosphate pH = 6.5 Chambre froide a +4''C (cf M-P-05) p— glucuronidase Chambre froide a +4''C Azote USADA 0295 (6