LNDD

MODE OPERATOIRE

Codification : M-EX-04B
Version : E
Date :01/12/2005

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METHODE DE PREPARATION - CONFIRMATION DE LA TESTOSTERONE ET DE

L'EPITESTOSTERONE

Aj outer la (ou les ) sabstance(s)
recherchee(s) dans le test de
performance et les refeiences

Ajuster k pH =7

Ajouter ImLde tampon pH= 6.5

Pipette a poussee positive
C6ne eppendorf

?^ierpH0-14
Vortex

Pipette Biohit l-5mL, c6ne

Agiter

1 Ajouter line gouttedebetaglu dans 1' I
aliquote fehantillon Jt hydrolyser |

I Boucher et aRiter 1 sec |

Vortex

Compte gouttes

Vortex

I Hydrolyser60mina55°C 1 Etuve

Centrifugeuse 4000tr/niin

CeatrifiiRer 5 mm

Extraiie sur SPE GE^ON
selon I-EX-1 1 (application anabo)

Traosvaser les eluats

Evaporer environ 30 mip

Deliver en tube fermi
20 min a 60°C avec SOfxL de reactif H

i lj

Conditionner en vial plastique

prealablement identifies selon I-

TRAC-03A

Gilson

Cartouche SPE CIS

Tube recueU Gilson (12.5* 100)

Tube avis (13*100)

Bain a sec a 60°C, soufflettes

Bain k sec a 60''C
Seringue Hamilton 100|iL

Vial plastique

Flacon compte gouttes
K2C03 et CH3C00H

Tampon pH=6.5 k +4=C
(cfM-P-05)

beti^ucuronidase

+4°C(b-glu)

i^

Azote

Reacdf H2 (cf M-P-
03B)

USADA 0262

T>k