LNDD

MODE OPERATOIRE

Codification ; M-EX-04B
Version : E
Date ;01/12/2005

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METHODE DE PREPARATION - CONFIRMATION DE LA TESTOSTERONE ET DE

L'EPITESTOSTERONE

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Ajouter la (ou les ) siibstance(s)
recherchee(s) dans le test de
performance et les references

Pipette ipoussee pos
C6ne eppendorf

Ajuster k pH =7

Ajouter ImL de tampon pH = 6.5

Agiter

Ajouter une goutte de betaglu dans 1'
aliquote echantillon i hydrolyser

Boucher et a^ter 1 sec

Hydroly:

ser60inina55''C

Ceatrifiiger 5 min

Extr^re sur SPE GILSON
selon I-EX-U (application anabo)

Transvaser les ^luats

Evaporer environ 30 mia

Deriver en tube feime
20 min a 60°C avec 50^L de r^ctif H

Conditionner en vial plastique

pr6alablement identifies selon I-

TRAC-03A

P^ier pH 0-14
Vortex

Pipette Biohit l-5mL, c6ne

Vortex
Compte gouttes

Vortex
Etuve

Centrifiigeuse 4000tr/min

Gilson

Cartouche SPE CI 8

Tube recueil Gilson (12.5* 100)

Tube avis (13*100)

Bain k sec a eO'C, soufilettes

Bain a sec a 60°C
Seringue Hamilton lOOfiL

Vial plastique

Flacon compte gouttes
K2C03etCH3COOH

Tampon pH=6.5 a +4°C
(cfM-P-05)

betaglucuronidase a
+4°C(b-Blu)

%-..

'/(I

Azote

R6actif H2 (cf M-P-
03B)

L,r

USADA 0196

^S3