r.

L:

LNDD

MODE OPERATOIRE

Codification : M-EX -24
Version : C
Date :17/01/2006

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METHODE DE PREPARATION POUR LA CONnRMATION DE L'ORIGINE DES
METABOLITES DE LA TESTOSTERONE PAR GC/C/IRMS

Operations

Dissoudre ct reunir dans un tube

les extraits du meme echantillon :

Mettre de cote un tube sec

Ajouter 500 ^1 d'acitonitrile dans
Ics aiitres tubes ct agiter 10s avant
de les transvaser dans le tube sec

Materiel

Pipettman de 1 m)
Pipette pasteur
Vorte

3PECiM

Reactifs et produits

Acetonitrile

i ;

Rincer les tubes transvases avec
500iil d'acetonitrile

Evaporation a sec

Pipettman de 1 ml
Pipette pasteur

Bain a sec a 60°C

Acetonitrile

Azote

u

Ajouter 50 ^1 de pyridine
Ajouter 50 nl d'anhydride acetique

Pipettman de 50 jil - Cones Greincr
Vortex

Pyridine dessech£e
Anhydride acetique > 99%

n

n

i 1
u

a

[J

J

Rcprendre par rotation legere du
tube en position quasi horizontale

Agiter 5 secondes et bouchcr

Denver le tube bien ferme 1 hOO

a eO^Cou laisser
une nuit a temperature ambiante

Evaporation a sec

Ajouter 1 ml d'acetonitrile

Agiter 10 secondes

Ajouter 1 ml d'eau ultrapure

Agiter 10 secondes

Extraire sur SPE Rapid Trace
scion I-EX-08

Evaporation a sec des fiactions

Fl (environ 2h00)

F2 (environ lh30)

F3 (environ 45min)

Vortex

Bain 4 sec a 60°C

ou

Portoir a tubes sous hotte

Bain k sec k 60°C

PipetteBiohitl-Sml
Cones Biohit

Vortex

Cartouches Baker Ci8 500 mg
Tubes kimble 13x100 mm

Bain a sec a SOX

CONFIDENTIEL

Azote

Acetonitrile
Eau ultrapure

Azote

USADA0107

2)^