LNDD MODE OPERATOIRE Codification : M-EX-04B Version : E Date :01/12/2005 2/3 METHODE DE PREPARATION - CONFIRMATION DE LA TESTOSTERONE ET DE L'EPITESTOSTERONE Ajouter la (ou les ) substance(s) recherchee(s) dans le test de performance et les references Ajuster a pH =7 Ajouter lmL de tampon pH = 6.5 Agiter Ajouter une goutte de betaglu dans 1' aliquote echantillon a hydrolyser I Boucher et agiter 1 sec I | Hydrolyser 60 min a S5°C 1 Etuve Centrifuger 5 min Extraire sur SPE GILSON selon I-EX-1 1 (application anabo) Transvaser les eluats Evaporer environ 30 min Denver en tube ferine" 20 min a 60°C avec 50uL de reactif H Conditionner en vial plastique prealablement identifies selon I- TRAC-03A Pipette a poussee positive Cone eppendorf Papier pH 0-14 Vortex Pipette Biohit l-5mL, cone Vortex Compte gouttes Vortex Centrifugeuse 4000tr/min Gilson Cartouche SPE CI 8 Tube recueil Gilson (12.5* 100) Tube avis (13*100) Bain a sec a 60°C, soufflettes Bain a sec a 60°C Seringue Hamilton lOOuL Vial plastique SPECIMEN Flacon compte gouttes K2C03 et CH3COOH Tampon pH=6.5 a +4°C (cfM-P-05) betaglucuronidase a +4°C ( b-glu) ™**iiq Azote Reactif H2 (cf M-P- 03B) USADA 0075 61