LNDD MODE OPERATOIRE Codification : M-EX-04 Version : D Dale :03/l 1/2005 1/3 METHODE DE PREPARATION PES ALIQUOTES - DEPISTAGE RAPIDE ANABO Documents utilisis: M-P-03B. I-N-25, 1-M-01, 1-tRAC-Ol. Remplir Venregistrement E-TE-02J Cj? V ,#^ OPERATIONS Prise d'essai = 2 mL H MATERIEL Tubes 16x100 Pqwtle 1-5 mL, c6nes dc 5 mL RtACTIFS ET PRODUITS Ajouter 100 nL de SIm02 Pipette Eppendorf i dSplacemcnt positif Solution de nounethyltestostirone ARJter au vortex Combitips Vortex Ajiistcr & pH = 7 en agitant au vortex Papier pH 0-14 n Ajouter ImL de tampon pH=6. 5 Aeiter au vortex Ajouter une Routte de p-giu Agiter au vortex Boucher les tubes 3 Hvdrolvscr Ih a 55°C Vortex Dispensette Vortex Flacon con^te goutte Vortex Bouchoos Etuvc Laisser re&oidir k temperature ambiante + Androstirone D4-glucuronide + salbuD3(CH-FR.l) Flacons conptc gouttes K2C03, CH3COOH Solution tampon pH 6.5 (CH-FR.I) p-glu: p-glucuronidase (CH-FR-1) comoEmEL ASSURANCE QUAUTt LNDD Ajouter 1 00 iiL de tampon pH= 1 1 Pipette Eppendorf h dSplacement positif Solution lan^n pH 1 1 Combitips Agiter au vortex Ajuster d pH = 9 en agitant au vortex D Ccntrifiigei 5 min Tiansvaser Ic sumageant Vortex Papier pH 7-14 Vortex Centrifiigueuse i 4000 tr/imn Tubes & hdmolyse 12,5x100 Flacons con^te gouttes K2C03, CH3CO0H APPLICABLE le X (I3HOV.2005 Extraire par SPE scion la mfithode ANABO Cf I-N-25 cl I-M-01 Gilson ASPEC XL4 Cartouches Bond Elut C18, 200nig/3mL Bouchons d'itancbiili Tubes^hdraolysc 12,5x75 US AD A 0037 3t3.